生物谷

  • 推荐悬浮细胞为什么不易转染

       悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面,在培养液中呈悬浮状态生长,如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染,其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。   目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂,脂质体转染是基于电荷吸引原理,先形成脂质体-DNA复合物,散布在细胞周围,然后通过细胞的内吞作用,将目的基因导入细胞内,而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细[更多]

    2018-01-17 18:34:30 阅读(602) 评论
  • 推荐DNA转染试剂(Entranster)文献3

    9.PLoS One. 2012;7(11):e49567.The Ubiquitin Ligase TRAF6 Negatively Regulates the JAK-STAT Signaling Pathway by Binding to STAT3 and Mediating Its Ubiquitination.10.Appl Microbiol Biotechnol. 2013 Jul[更多]

    2017-12-29 15:23:26 阅读(680) 评论
  • 推荐DNA转染试剂(Entranster)文献2

    5. Oncotarget. 2015 May 30. Wedelolactone disrupts the interaction of EZH2-EED complex and inhibits PRC2-dependent cancer (蟛蜞菊内酯干扰ezh2-eed复合物相互作用且可以抑制PRC2依赖性肿瘤)(IF:6.359 )6.Molecular and Cellular Biol[更多]

    2017-12-29 15:22:16 阅读(616) 评论
  • 推荐DNA转染试剂(Entranster)文献1

    1.Toxicology and Applied Pharmacology. 2017 Mar 3. Molecular mechanisms of 3,3′4,4′,5-pentachlorobiphenyl-induced epithelial-mesenchymal transition in human hepatocellular carcinoma cells.(人肝癌细胞上皮-间质转[更多]

    2017-12-29 15:19:44 阅读(620) 评论
  • 推荐ECL发光液(Enlight)文献8

    35.Pharmacology. 2013;92(3-4):121-30.Effect of phorbol 12-myristate 13-acetate on function and gene expression of P-glycoprotein in adriamycin-resistant K562/ADM cells.36.Chem Biol Interact. 2014 Feb [更多]

    2017-12-29 15:18:04 阅读(501) 评论
  • 推荐ECL发光液(Enlight)文献7

    32.J Med Food. 2013 Apr;16(4):280-7.Effect of kai xin san on learning and memory in a rat model of paradoxical sleep deprivation.33.Metallomics. 2013 Jun 27;5(7):836-43.Vanadium compounds modulate PPA[更多]

    2017-12-29 15:16:58 阅读(457) 评论
  • 推荐ECL发光液(Enlight)文献6

    29.Ann Hepatol. 2013 Sep-Oct;12(5):815-21.Notch signal protects non-parenchymal cells from ischemia/reperfusion injury in vitro by repressing ROS.30.PLoS One. 2013;8(3):e59610.Oxidative stress induces[更多]

    2017-12-29 15:15:55 阅读(463) 评论
  • 推荐ECL发光液(Enlight)文献5

    22.J Virol. 2015 Mar. Hepatitis B virus regulates apoptosis and tumorigenesis through the microRNA-15a-Smad7-transforming growth factor beta pathway.(乙型肝炎病毒通过microrna-15a-smad7转化生长因子β通路调节细胞凋亡和肿瘤发生)23.[更多]

    2017-12-29 15:14:57 阅读(414) 评论
  • 推荐ECL发光液(Enlight)文献4

    18. Acta Pharmacol Sin. 2016 Jan 25. Schisandrol B protects against acetaminophen-induced acute hepatotoxicity in mice via activation of the NRF2/ARE signaling pathway (小鼠急性肝损伤研究)19. Sci China Life Sc[更多]

    2017-12-29 15:13:56 阅读(462) 评论
  • 推荐ECL发光液(Enlight)文献3

    14.Mol Med Rep.. 2015 Sep. Myosin light chain kinase inhibitor ML7 improves vascular endothelial dysfunction via tight junction regulation in a rabbit model of atherosclerosis.(肌球蛋白轻链激酶抑制剂ML7对动脉硬化模型小鼠[更多]

    2017-12-29 15:13:05 阅读(460) 评论
  • 推荐ECL发光液(Enlight)文献2

    8. Acta Biochim Biophys Sin (Shanghai) 2016 Mar 2. Intermolecular disulfide bond in the dimerization of S-periaxin mediated by Cys88 and Cys139.(由Cys88 和 Cys139介导的S-periaxin 蛋白二聚体中分子间的二硫键)9. Mol Med R[更多]

    2017-12-29 15:11:55 阅读(425) 评论
  • 推荐ECL发光液(Enlight)文献1

    1.Nature Communications. 2016 Mar 31. Zyxin-Siah2–Lats2 axis mediates cooperation between Hippo and TGF-β signalling pathways.(低氧微环境协同TGF-β信号以及Hippo信号在肿瘤发展中的作用)( IF:11.329 )2. Nat Cell Biol. 2015 Jan.[更多]

    2017-12-29 15:10:51 阅读(381) 评论
  • 推荐RNA转染试剂(Entranster)文献8

    29.Cell Signal. 2013 Jan 15.SASH1 regulates melanocyte transepithelial migration through a novel Gαs-SASH1- IQGAP1-E-Cadherin dependent pathway.30.J Immunol. 2013 Jan 25.Multiple Tumor-Associated Micr[更多]

    2017-12-29 14:48:39 阅读(422) 评论
  • 推荐RNA转染试剂(Entranster)文献7

    25.Cytokine. 2012 Jul 29. BLyS expression and JNK activation may form a feedback loop to promote survival and proliferation of multiple myeloma cells.26.Genes Immun. 2012 Oct 4.TGF-β-associated miR-27[更多]

    2017-12-29 14:47:35 阅读(434) 评论
  • 推荐RNA转染试剂(Entranster)文献6

    21.Virus Res. 2012 Jan;163(1):183-9.Small interfering RNA against the 2C genomic region of coxsackievirus B3 exerts potential antiviral effects in permissive HeLa cells.22.Genes Immun. 2012 Jan 26.Glo[更多]

    2017-12-29 14:42:30 阅读(428) 评论
  • 推荐RNA转染试剂(Entranster)文献5

    17.Microvasc Res. 2010 Jan 14. A PKC-beta inhibitor treatment reverses cardiac microvascular barrier dysfunction in diabetic rats.18.J Immunol. 2011 Apr 15;186(8):4716-24.Both miR-17-5p and miR-20a Al[更多]

    2017-12-29 14:41:08 阅读(427) 评论
  • 推荐RNA转染试剂(Entranster)文献4

    13.Immunol Res. 2015 Jun. Decreased expression of microRNA-125a-3p upregulates interleukin-23 receptor in patients with Hashimoto’s thyroiditis.(microRNA-125a-3p的低表达可以上调淋巴瘤性(样)甲状腺肿病人白细胞介素-23受体的水平).14.[更多]

    2017-12-29 14:38:48 阅读(438) 评论
  • 推荐RNA转染试剂(Entranster)文献3

    9.Apoptosis. 2015 Jan. RIP1-dependent Bid cleavage mediates TNFα-induced but Caspase-3-independent cell death in L929 fibroblastoma cells.(成纤维细胞瘤细胞研究)10. PLoS One. 2015 Mar 31. MicroRNA-22 impairs ant[更多]

    2017-12-29 14:37:44 阅读(449) 评论
  • 推荐RNA转染试剂(Entranster)文献2

    5. Tumour Biol. 2016 Mar. MiR-30a regulates the proliferation, migration, and invasion of human osteosarcoma by targeting Runx2.(MiR-30a通过靶向作用于小家畜相关的转录因子2(Runx2)进而调节人骨肉瘤细胞的增值、迁移及侵袭)6. Stem Cells Dev. [更多]

    2017-12-29 14:36:37 阅读(448) 评论
  • 推荐RNA转染试剂(Entranster)文献1

    1. Journal of Cellular and Molecular Medicine. 2016 Nov 25. A novel P53/POMC/Gαs/SASH1 autoregulatory feedback loop activates mutated SASH1 to cause pathologic hyperpigmentation.(SASH1引起病理性色素沉着研究)2.Jo[更多]

    2017-12-29 14:32:33 阅读(409) 评论
  • 推荐体内DNA转染试剂(Entranster)文献2

    4.Cancer Res. 2015 Jan 19. pii: canres.1831.2014.Targeting LunX inhibits non-small-cell lung cancer growth and metastasis.(IF: 9.329.) (肺癌)5.Biochemistry (Moscow). 2014 Jan 12.Hepatitis B Virus Can Be[更多]

    2017-12-29 14:25:49 阅读(422) 评论
  • 推荐体内DNA转染试剂(Entranster)文献1

    1.PeerJ. 2016 Nov 1 . Therapeutic role of human hepatocyte growth factor (HGF) in treating hair loss.(人肝细胞生长因子在脱发中的治疗作用)2.Scientific Reports. 2016 Sep 19. Transient receptor potential channel 1/4 redu[更多]

    2017-12-29 14:24:40 阅读(425) 评论
  • 推荐体内转染试剂(Entranster)文献14

    63.J Cereb Blood Flow Metab. 2013 Jan 9.SirT1 mediates hyperbaric oxygen preconditioning-induced ischemic tolerance in rat brain.(IF:5.407.) (脑室注射siRNA研究脑缺血机理)64.Cancer Lett. 2012 Jan 28;314(2):223-31[更多]

    2017-12-29 14:23:31 阅读(400) 评论
  • 推荐体内转染试剂(Entranster)文献13

    59.Journal of Alzheimer’s disease.2013 Sep 18.IL12/23 p40 Inhibition Ameliorates Alzheimer’s Disease-Associated Neuropathology and Spatial Memory in SAMP8 Mice.(脑室注射siRNA研究对阿耳茨海默氏病的治疗)60.Purinergic Si[更多]

    2017-12-29 14:22:22 阅读(440) 评论
  • 推荐体内转染试剂(Entranster)文献12

    55.Neurosci Lett. 2014 Mar 11.Autophagic effect of programmed cell death 5 (PDCD5) after focal cerebral ischemic reperfusion injury in rats.(凋亡相关研究)56.Mol Immunol. 2014 Jan 21;59(1):30-38.Inhibition o[更多]

    2017-12-29 14:21:24 阅读(384) 评论
  • 推荐体内转染试剂(Entranster)文献11

    51.Cell Death Dis. 2014 Dec 11;5:e1571.BMPR2 inhibition induced apoptosis and autophagy via destabilization of XIAP in human chondrosarcoma cells.(IF:5.014.)(软骨肉瘤相关,siRNA皮下肿瘤注射)52.Biomed Res Int. 2014[更多]

    2017-12-29 14:19:40 阅读(386) 评论
  • 推荐体内转染试剂(Entranster)文献10

    47.J Neuroinflammation, 2015 Jan 28. NLRP1 inflammasome is activated in patients with medial temporal lobe epilepsy and contributes to neuronal pyroptosis in amygdala kindling-induced rat model.(NLRP1[更多]

    2017-12-29 14:13:52 阅读(434) 评论
  • 推荐体内转染试剂(Entranster)文献9

    43.Brain behavior and immunity, 2015 April 29. MicroRNA let-7c-5p protects against cerebral ischemia injury via mechanisms involving the inhibition of microglia activation.(MicroRNA let-7c-5p通过抑制小胶质细胞[更多]

    2017-12-29 11:42:29 阅读(363) 评论
  • 推荐体内转染试剂(Entranster)文献8

    39.Hepatology, 2015 JUL 3. MicroRNA-125b attenuates epithelial-mesenchymal transitions and targets stem-like liver cancer cells through small mothers against decapentaplegic 2 and 4.((MicroRNA-125b通过s[更多]

    2017-12-29 11:21:51 阅读(407) 评论
  • 推荐体内转染试剂(Entranster)文献7

    35. Cell Death Dis. 2016 Mar 24. Inhibition of glycogen synthase kinase 3β promotes autophagy to protect mice from acute liver failure mediated by peroxisome proliferator-activated receptor α.(抑制糖原合成酶[更多]

    2017-12-29 11:10:45 阅读(381) 评论
  • 推荐体内转染试剂(Entranster)文献6

    31. Cell Physiol Biochem. 2016 Jan Atorvastatin Inhibits Myocardial Apoptosis in a Swine Model of Coronary Microembolization by Regulating PTEN/PI3K/Akt Signaling Pathway.(阿托伐他汀通过调节PTEN/PI3K/Akt信号通路抑制[更多]

    2017-12-29 10:50:30 阅读(407) 评论
  • 推荐体内转染试剂(Entranster)文献5

    27.J Cardiovasc Pharmacol Ther. 2016 Feb 4. The PTEN/Akt Signaling Pathway Mediates Myocardial Apoptosis in Swine After Coronary Microembolization(PTEN / Akt信号通路介导猪冠状动脉微栓塞后心肌细胞凋亡)28.J Exp Clin Cancer [更多]

    2017-12-29 10:47:40 阅读(424) 评论
  • 推荐体内转染试剂(Entranster)文献4

    22.Experimental Eye Research. 2016 Oct. CD25 siRNA induces Treg/Th1 cytokine expression in rat corneal transplantation models.(CD25 siRNA诱导大鼠角膜移植模型中的Treg / Th1细胞因子表达)23.Chinese Journal of Biochemistry[更多]

    2017-12-29 10:42:40 阅读(442) 评论
  • 推荐体内转染试剂(Entranster)文献3

    18.Experimental and Therapeutic Medicine . 2016 Jun 7. Role of miR-145 in chronic constriction injury in rats.(miR-145在大鼠慢性压迫性损伤中的作用)19.Oncotarget. 2016 Sep 26. HMGB2 regulates satellite-cell-mediated[更多]

    2017-12-29 10:37:21 阅读(450) 评论
  • 推荐体内转染试剂(Entranster)文献2

    9.Plos one, 2016 March 9. MiR-3162-3p Is a Novel MicroRNA That Exacerbates Asthma by Regulating β-Catenin.( MiR-3162-3p通过调控β-链蛋白从而加剧哮喘的发作)10.International Journal of Molecular Medicine. 2016 May 31. m[更多]

    2017-12-29 10:21:11 阅读(408) 评论
  • 推荐动物体内转染试剂(Entranster)文献1

    1.Biochemical and Biophysical Research Communications. 2017 May 25. Targeting long non-coding RNA ASBEL with oligonucleotide antagonist for breast cancer therapy.(长链非编码RNA与乳腺癌治疗)2.Journal of Neurochem[更多]

    2017-12-29 10:13:44 阅读(427) 评论
  • 推荐动物体内转染研究新突破

    随着分子生物学的飞速发展,基因功能和基因治疗研究越来越收到人们的重视。人们尝试各种体内外方法探知相关基因及其生物特性。体外实验相对容易操作,体内相关研究目前主要有:动物体内转染和基因敲除动物。基因敲除动物基因敲除动物是通过DNA同源重组或基因的插入突变和RNAi原理制备,或通过诱导剂诱导获得。基因敲除动物可以实现基因的完全敲除,条件性基因敲除,基因 定点插入,点突变研究,人源化研究。但是,基因敲除[更多]

    2017-12-29 09:29:43 阅读(534) 评论
  • 推荐Entranster细胞转染试剂成分和作用原理

    EntransterTM系列转染试剂由纳米高分子聚合物组成,分子内含有许多氨基,在生理PH下会发生质子化,这些质子化的氨基可以中和DNA质粒表面的负电荷,使DNA 分子由伸展结构压缩为体积相对较小的DNA粒子,并包裹在其中,使DNA免受核酸酶的降解。转染复合物主要是通过细胞内吞作用将DNA 转移进入细胞,形成内含体(endosome),DNA从内含体释放,进入细胞质中,再进一步进入核内转录、表达。[更多]

    2017-12-29 09:12:07 阅读(421) 评论
  • 推荐Entranster体内转染效果如何加测

          使用Entranster体内试剂后,一般根据课题研究要求进行,如果单纯检测转染效率,推荐用qRT-PCR方法和luciferase方法。还可根据研究,采用组织学和生理学,以及物理测量的方法进行。由于体内转染的复杂性,通常体外试验中常采用的转染GFP蛋白用荧光显微镜观察的方法,由于体内取出的组织材料背景高,检测较为困难。 [更多]

    2017-12-29 09:06:39 阅读(424) 评论
  • 推荐悬浮细胞的siRNA转染过程

    悬浮细胞的siRNA转染操作步骤,以24孔板siRNA转染为例1.提前1天细胞种植 悬浮细胞:采用对数生长期的细胞,数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数是6×105,那么就用2×105的细胞进行转染。 2.转染过程 ⑴取0.67ug(50pmol)的siRNA,加入一定量无血清稀释液,充分混匀,制成RNA稀释液,终体积为25μl。 注意:无血清稀释液建议采用OPT[更多]

    2017-12-29 09:03:48 阅读(428) 评论
  • 推荐为什么细胞转染试剂Entranster可以进行有血清转染?

        使用脂质体等转染试剂时,由于含血清转染会将血清中的蛋白带入细胞,引发细胞毒性,导致转染效率降低,故不能有血清转染。EntransterTM只浓缩包裹核酸不会将血清带入细胞,所以可以有血清转染,同时由于血清的存在,有利于细胞的状态维护,故能提高转染效率。 [更多]

    2017-12-29 09:01:46 阅读(436) 评论
  • 推荐western-blot实验过程

    Western,也称Western blot、Western blotting、Western印迹,是用抗体检测蛋白的重要方法之一。可按照以下步骤操作。 1.收集蛋白样品(Protein sample preparation) 使用细胞裂解液,对贴壁细胞、悬浮细胞或组织样品进行裂解。然后测定每个蛋白样品的蛋白浓度。2. 电泳(Electrophoresis) (1) SDS-PAGE凝胶配制 [更多]

    2017-12-28 17:20:14 阅读(377) 评论
  • 推荐为什么western-blot化学发光实验(ECL)会出现高背景?

    Western Blot发光经常有“背景太高”问题,导致“背景高”的原因有很多,主要有以下几个方面: 1. 抗体浓度过高,洗涤不充分,可以造成抗体在膜上的非特异结合,导致高背景。可通过降低抗体稀释度,增加洗膜次数和Buffer用量,或在Wash Buffer中添加终浓度0.05%的Tween-20加以改善。 2. 封闭不充分,会造成抗体在膜上的非特异结合,导致高背景。可通过4℃封闭过夜或增[更多]

    2017-12-28 17:17:59 阅读(412) 评论
  • 推荐ECL发光液的选择

         做western-blot实验时,选择一款好的发光液对实验的成功很重要,否则很容易发生各种问题,如淬灭,背景高,不灵敏,发光时间短等。比如淬灭,我觉得Western Blot“淬灭”的原因主要在两方面:含HRP的抗体和发光试剂。由于长期应用某种发光试剂,人们多注意了抗体,不知道发光试剂其实也会对实验结果造成重大影响。对抗体方面来说,可以采用适当降低[更多]

    2017-12-28 17:14:19 阅读(422) 评论
  • 推荐细胞转染试剂的选择

      现在市面上转染试剂种类繁多,质量良莠不齐,如何选择一款合适的转染试剂呢?  一款好的转染试剂,要具有较高的转染效率,较低的细胞毒性和较合适的价格。现在大多数实验室用的是lipo系列转染试剂,但是lipo试剂的毒性大,对某些细胞的转染效率很低,价格也很昂贵,实验成本高。尤其是在转染RNA方面,lipo的劣势较明显。  Entranster系列转染试剂是纳米材料的,不[更多]

    2017-12-28 17:11:51 阅读(446) 评论
  • 推荐电转染试剂对比(Entranster和Amaxa)

    由此可见,在转染各类细胞系时,Entranster-E具有明显的优势,是一款比较理想的电转染试剂。[更多]

    2017-12-28 16:14:39 阅读(394) 评论
  • 推荐DNA转染试剂Entranster-H4000和JetPEI-polyplus的对比

    由此可见,Entranster-H4000具有更好的转染效果。[更多]

    2017-12-28 15:30:18 阅读(395) 评论
  • 推荐细胞转染效率重复性差的原因

    转染效率重复性差:细胞融合度不同。保证同样的接种量及同样的时间。细菌污染。可使用Entranster试剂,培养基可加抗生素,避免细胞污染。细胞传代次数太高了。可重新复苏一管新的细胞。血清质量不稳定。用同一批号的血清。 [更多]

    2017-12-28 14:56:16 阅读(400) 评论
  • 推荐RNA转染效率低的原因

    RNA转染效率低,可能的原因:·         转染试剂不适合。建议选择RNA专用转染试剂,如Entranster-R4000,纳米材料,毒性低,效率高。·         转染试剂和RNA的量不够,或者比例不对。优化实验条件,调整试剂和[更多]

    2017-12-28 14:25:29 阅读(414) 评论
  • 推荐RNA转染P4E6细胞效果图(Entranster)

    [更多]

    2017-12-28 13:54:17 阅读(406) 评论
  • 推荐RNA转染试剂(Entranster)效果图

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    2017-12-28 13:52:08 阅读(446) 评论
  • 推荐RNA提取试剂-Trizen

    RNA提取试剂-Trizen(engreen)产品特点1、所得RNA无DNA和蛋白污染。一般所得RNA溶于DEPC水后的A260/280值为1.8-2.0。2、卓越的细胞溶解能力,轻松应对各类待提样品。3、保持样品RNA的完整性,有效抑制RNA降解。4、对动植物细胞或组织以及血清、病毒和细菌均适用,配方更优,效果更好。5、性价比更高,秒杀同类产品。Trizen所提RNA电泳图片[更多]

    2017-12-28 13:06:40 阅读(638) 评论
  • 推荐qPCR试剂对比4

    由此可知,engreen的qPCR试剂不会有非特异性扩增产物发生,是理想的qPCR试剂[更多]

    2017-12-28 13:02:35 阅读(596) 评论
  • 推荐qPCR试剂对比3

    如图所示,engreen的产品在实验中,Ct值更低,无NTC扩增,特异性高,是理想的qPCR试剂。[更多]

    2017-12-28 13:00:55 阅读(562) 评论
  • 推荐qPCR试剂对比2

    上图为engreen的qPCR试剂,通过对比,可以发现engreen的qPCR试剂不会出现NTC扩增产物,特异性更高。[更多]

    2017-12-28 12:59:18 阅读(562) 评论
  • 推荐qPCR试剂对比

    如图所示,engreen的qPCR试剂不会出现引物二聚体,特异性非常好,是理想的qPCR试剂[更多]

    2017-12-28 12:56:41 阅读(611) 评论
  • 推荐PCR试剂效果图(engreen)

    如图所示,engreen的PCR试剂跑出来的条带清晰,准确,无非特异性扩增条带,是理想的PCR试剂。[更多]

    2017-12-28 11:41:50 阅读(590) 评论
  • 推荐为什么磷酸钙细胞转染不稳定?

    磷酸钙在良好的转染条件下,可以在293T等细胞的转染达到较高的转染效率。但磷酸钙转染有一个突出的问题,非常不稳定,尤其受PH值的影响非常大,在实验中使用的每种试剂都必须小心校准,保证质量,因为甚至偏离最优条件十分之一个PH都可能导致磷酸钙转染的失败,经常即使最熟练的转染实验者也不能保证每次磷酸钙转染的成功,他们可能经常为莫名其妙的转染失败而沮丧。同时,他们还经常发现,往往小体积的转染比如6孔板以下[更多]

    2017-12-28 11:22:07 阅读(456) 评论
  • 推荐如何提高病毒感染效率?

       可使用病毒感染增强剂envirus提高病毒的感染效率,下面以慢病毒为例,说一下实验过程。1.提前一天细胞铺板 提前一天将细胞种植在24孔板中,以感染时细胞融合度在50%左右为宜(悬浮细胞根据需要调整,不要采用过高的细胞密度)。 2.感染 ⑴将2ul的EnvirusTM-LV用25μl无血清稀释液稀释,充分混匀,制成EnvirusTM-LV稀释液。4℃静置5分钟。 注:感染[更多]

    2017-12-28 11:17:20 阅读(649) 评论
  • 推荐体内转染(Entranster)研究与中风相关的miRNA

       MicroRNAs(miRNAs)是一类非编码小RNA,miRNAs能结合到靶基因mRNA的3’非翻译区诱导转录退化和/或抑制翻译。miRNA在多种病理生理过程中发挥着重要的作用。   Let-7c是最丰富且高度保守的miRNA。以往的研究表明,let-7c通过调节细胞增殖和细胞凋亡抑制癌细胞存活率。最近研究表明Let-7c是巨噬细胞极化的重要调节器。[更多]

    2017-12-28 09:16:37 阅读(679) 评论
  • 推荐细胞转染为什么不能加血清?

    传统的转染试剂有一定的细胞毒性,在转染过程由于提高细胞的通透性因而不能在培养基中添加抗生素。如,阳离子脂质体。带正电的脂质体与核酸带负电的磷酸基团形成复合物被细胞内吞。血清中含有大量的蛋白质,在转染过程中,带负电的蛋白质可能干扰阳离子脂质体对核酸的吸附,影响转染效率。另外,使用脂质体等转染试剂时,由于含血清转染会将血清中的蛋白带入细胞,引发细胞毒性,导致转染效率降低,故不能有血清转染。这些转染试剂[更多]

    2017-12-28 09:06:39 阅读(630) 评论
  • 推荐动物转染(Entranster)和病毒感染比较

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    2017-12-28 08:59:26 阅读(453) 评论
  • 推荐动物转染(Entranster)和基因敲除比较

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    2017-12-28 08:58:23 阅读(458) 评论
  • 推荐siRNA转染和DNA转染有什么不同?

         首先siRNA由于只有二十几个碱基对,相比DNA几千上万对碱基,小了许多。目前大多数转染试剂都针对比较大的质粒DNA,而非小的RNA分子。用于转染DNA的转染试剂和方法并不完全适用于转染siRNA。  其次,siRNA转染比DNA转染对转染试剂细胞毒性的要求严格。由于转染试剂对细胞的毒性往往是对众多基因直接地或间接地上调或下调的[更多]

    2017-12-28 08:56:36 阅读(450) 评论
  • 推荐流式检测细胞周期操作步骤

    流式检测细胞周期操作步骤1. 细胞培养:取对数生长期的细胞,按1×106cells/ mL以1mL接种24孔板或2mL接种于6孔板内,进行所需的处理(比如加入药物),特定时间后终止培养,进行下一步的实验。2. 细胞固定: 800rpm离心5min,收集细胞沉淀,弃上清,用预冷PBS洗涤两次,加入预冷75%乙醇,于4℃固定4h以上。 3. 细胞染色:1500rpm离心5min,弃上清,以3mL的PB[更多]

    2017-12-28 08:54:24 阅读(695) 评论
  • 推荐siRNA细胞转染实验步骤

    下面以Entranster-R4000试剂为例,说一下siRNA转染步骤(24孔板)1.提前1天细胞种植 贴壁细胞:提前一天将细胞种植在24孔板中,以转染时细胞汇合度(Confluence)在30%左右为宜,转染前全培养基总量为0.45ml。 悬浮细胞:采用对数生长期的细胞,数量为常规培养细胞数的1/3进行转染实验。如某细胞常规培养的细胞数是6×105,那么就用2×105的细胞进行转染。 2.转染[更多]

    2017-12-28 08:53:21 阅读(499) 评论
  • 推荐western-blot实验过程中ECL检测实验步骤

    ECL Western特异发光检测试剂盒用于辣根过氧化物酶(HRP)标记的蛋白或核酸检测。下面以engreen的超敏型ECL发光液Enlight-Plus为例,说一下检测实验步骤。 1. 常规电泳、转膜、HRP 标记抗体或核酸探针孵育、洗膜。以下操作在室温进行。 注意:Enlight-Plus 推荐的抗体稀释度为:储存液浓度为1mg/ml 的一抗推荐稀释度 储存液浓度为1mg/ml 的[更多]

    2017-12-28 08:40:01 阅读(716) 评论
  • 推荐电转染实验注意事项

    1.       选择合适的电场强度合适的电场强度对于电转染实验非常重要,电场强度不能过高,过高会增加细胞的死亡率;也不能过低,过低不能增加膜的通透性或在膜上形成小孔。不同细胞系具有不同的最佳场强值,实验前应测定所转染细胞系的最佳电场强度。2.  细胞的选择用于电转的细胞一般选取处于对数生长期的细胞(15代以内,传代后2d)。因[更多]

    2017-12-27 16:34:00 阅读(651) 评论
  • 推荐如何有效提高细胞实验转染效率?

    1.选择合适的转染试剂   不同细胞系转染效率通常不同,但细胞系的选择通常是根据实验的需要,因此在转染实验前应根据实验要求和细胞特性选择适合的转染试剂。每种转染试剂都会提供一些已经成功转染的细胞株列表和文献,通过这些资料可选择最适合实验设计的转染试剂。当然,最适合的是高效、低毒、方便、廉价的转染试剂。如英格恩的纳米材料的Entranster试剂。2.保持最佳的细胞状态 [更多]

    2017-12-27 15:24:17 阅读(551) 评论
  • 推荐细胞增殖毒性检测步骤

    CCK8试剂盒,是用于测定细胞增殖或毒性实验中活细胞数目的一种高灵敏度,无放射性的比色检测法。CCK法应用非常广泛,如药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验以及生物因子的活性检测等。下面以engreen的CCK8试剂盒为例,简要说明细胞增殖-毒性检测的操作步骤方法/步骤在96孔板中配制100μl的细胞悬液。将培养板在培养箱预培养 24 小时 (在 37℃,5% CO2 的条件下)。向培[更多]

    2017-12-27 13:37:49 阅读(574) 评论
  • 推荐细胞转周期与细胞凋亡分析

    CCAA试剂盒(Cell Cycle and Apoptosis Analysis Kit)是基于PI 染色(Propidium staining)方法进行细胞周期与细胞凋亡分析的试剂盒。 下面以engreen的CCAA试剂盒为例,说明一下检测方法。 1.收集并调整细胞浓度为1×106/ml,取1ml单细胞悬液进行后续操作。 1)贴壁细胞:小心吸除细胞培养液,用胰酶消化细胞,制备单细胞悬[更多]

    2017-12-27 12:55:20 阅读(601) 评论
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